请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

1179240331

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同问同问

sunny.yc

回复 daifenghao 的帖子3 |( J: P5 v, b3 ^- o. }

# I5 H+ m6 E4 g: i; A你们的血浆经过灭活处理了吗

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子* ^, q7 j  ~% S, J. [
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实际上，在贴壁过程中就已经出现絮状物了，此时是没有添加细胞因子的。但是，有的细胞确实是在培养后出现絮状物的，可能还是不同人对相同细胞因子的耐受程度不一样吧，还需要多积累经验啊，多谢~

lyj-0017

回复 xu_shufen 的帖子
9 ]: a2 y# ~& D( L) n3 v( {; H# d7 L6 k# ^6 H: S7 O6 s' ?, T4 v( P
嗯，我也认为是纤维蛋白类物质引起的，也可能是细胞量过大的原因，血小板的可能不大，因为分离MNC时都是先把白膜层上方大部分液体先吸掉的，血小板剩余量应该不多

lyj-0017

回复 daifenghao 的帖子9 J# O  }2 N1 ~) W  R# R/ |' f
  o+ C  t5 S! v% y, d1 M
添加进去的应该用血清吧？血浆里面本身就含有大量纤维蛋白，加入血浆后出现絮状物应该在情理之中才对

lyj-0017

回复 1179240331 的帖子  m) E$ r! J" \2 h
" ]* n( g. o  b
我们现在也在注意血浆物质残留的问题了，分离MNC时也已经严格清洗了，观察一下看看吧。
! O& G* @8 w+ e采血要是混合不均匀的话，凝血也会使得分离的MNC量减少吧。
6 H( `( u6 O9 H" M% u$ B你的意思他们分离出MNC后进行培养时出现细胞团块吗？

sunny.yc

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6 u3 r* D+ O$ y% i0 A( @1 N3 a3 y1 a$ J" E/ {( n; W( o  [
如果贴壁的时候有絮状物，是不是血浆的问题，你们用的血浆经过灭活处理过的吗？

lyj-0017

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# g9 d7 P9 k9 w" X: M. {! p. g8 a: {: b: w2 R* i
我们贴壁的时候只加培养基，没有同时添加血浆（加血浆还是血清？）。' ~" u1 ]) u9 A# H1 c6 {7 d
如果加点白蛋白会不会好点呢？

lyj-0017

回复 chenguangyu 的帖子1 z( J" d; A3 ?0 i( q
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最近细胞生长的状态如你所说，袋内白膜确实是逐渐自动散开了，并且细胞长势还不错。但是有时候，加液后，原本长得不错的细胞会聚团，像是细胞死掉了聚团？这是什么原因呢？

lyj-0017

回复 daifenghao 的帖子
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我现在发现，细胞铺袋后不要摇晃袋，让细胞自己调整，过几天白色丝膜就会自动消失，你们可以观察一下试试