请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

硕果累累_555

细胞图片不清晰，有可能是转袋没有拍散细胞聚集生长，但看着不像，还有一种可能是培养细胞所用器皿或者瓶袋的质量不好，有微量残留造成的。

lyj-0017

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没有添加血浆，我们不用血液离心完后的血浆的

lyj-0017

回复 daifenghao 的帖子) u+ R3 s2 n! q' G3 k3 L
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会不会是我们分离白膜层之后，清洗细胞不够，导致残留的血浆也一同加入培养袋中了呢？

lyj-0017

回复 孙帅帅 的帖子1 h, u. m1 U8 V, A% T7 j- x9 r
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我知道你说的这种操作，关键是你们是用50-100ml外周血分离MNC，我们是机采分离MNC，机采采集的MNC数量肯定比前者数量要多的多，这两种方式的培养情况肯定不一样的

lyj-0017

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* J$ L. F  |# S# C! c) P+ \; N1 l2 C  w' E9 L
我们转袋之前都是把细胞吹散的，会不会是细胞密度太大的缘故呢？$ L7 i& X' W5 j  K$ n
另外，我们用的都是康宁的瓶子，TAKARA的袋子，质量应该没问题吧

sunny.yc

回复 sunny.yc 的帖子3 q! N. u& l8 V: u+ {2 F

5 o! d8 ]- q; O) O我们之前也遇到过这个情况，当时是在包被过的培养瓶中，聚团非常大，而且瓶中的散落的细胞几乎没多少了，细胞碎片也比较多，吹打开也没用，过段时间还会重新聚集。
+ O- `7 w/ D) Z6 ]这种情况也咨询过别人，得到的一种答案我觉得还比较靠谱，就是，细胞形成集落了，但我感觉还是细胞受刺激过度。
  K) N5 i2 Z, [( ^2 }" q是不是你的细胞因子浓度太高导致的呢？

1179240331

5 f' _, u& y( ]3 W, `
% N# M% f5 q  c* u, y
回复 lyj-0017 的帖子" W! R( ~' M$ _: D0 n8 x  v" O

* [9 s7 z4 Y* x& }静脉采外周血培养也出现过这种情况，红细胞稍多些，粘连在培养瓶底，吹不散，团块状，像破网，很想知道原因

1179240331

回复 daifenghao 的帖子( o* A& K3 A& `0 Y& s

  p" ]  i; y2 d. W. u0 K请问自体血浆吗？是否灭活呢？试过加8%未灭火自体血浆，会成团块

lyj-0017

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  O6 S. L& R2 z+ m" q7 P- C
2 |3 c: u4 U$ P4 F9 T跟你说的现象一样，MNC贴壁之前都是吹散的，放入培养箱贴壁之后，培养上清中就会出现团块状物质，就是网状粘连，培养袋中底部铺成一层膜。难道就是红细胞过多的原因？或者是分离MNC后，清洗过程还有残留的少量血浆？

lyj-0017

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) G' y. J' j( z  D) D4 m1 J- Z! o- e1 n1 d9 L  c; \
那你们后来如何处理的呢？处理之后情况有所改善吗？