请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

lousia04306

培养袋中的细胞需要进行过滤，里面有细胞聚集的现象

spring1221

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" H  H* f4 J* r* o) j6 R- y# T( V楼主，你好。你们出现的情况我也遇到过，我认为是细胞量过大的问题，我们采取的处理方法是添加一定量的白蛋白，还有就是cik的培养过程中特别是要加液时要注意进行摇晃或者吹打。另外需要注意的是培养的cik在采集过程中要进行过滤，希望能解决你的问题。

lyj-0017

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1 }9 ^/ D, {1 s0 ^9 W- x  o4 r9 K$ ^# q8 ?! B# _+ ?
非常感谢，经验之谈！
* J6 b' I9 O8 @: x我也觉得是细胞量过大的问题，白蛋白是加到哪里呢？清洗的PBS还是培养液中？其余的措施都按照你说的注意一下，再观察一下吧。
3 }3 D* F7 r& p- O  V8 B* U0 }5 E那么你们以后的培养过程中也还有这种情况出现吗？

lyj-0017

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& l) U& U" u' J/ r
/ ^( i: [3 M8 [我就是想知道细胞聚集的原因啊？可否有合理的解释呢？

spring1221

回复 lyj-0017 的帖子( W- q. x" i- j4 ?) `* E
$ k2 w4 N4 M- @; Q0 l2 T
白蛋白是直接添加到培养液中的。我只遇到过2次，挺小概率的，感觉还是要注意，在加液过程中的摇晃吹打。最近没有出现。

lyj-0017

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1 p: i- e7 Q! c( H* o; }# D! {$ _1 V2 w, W+ U$ F
你们是直接采集外周血分离MNC还是机采MNC呢？培养都是用培养瓶而不用培养袋吗？

sunny.yc

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+ g: |: ?; k# Q% V- w
3 G& W8 P" m. q& E* @1 K不好说，我感觉你们的细胞因子添加量普遍略高，比如这么给您举个例子，同样是一样浓度的细胞因子添加量，平行试验，不同的样品来源，耐受程度是不一样的，有的样品聚团就很厉害，有的样品聚团就要少很多，对于CIK培养我做过不少，我建议你们可以尝试一下减少细胞因子的添加量，最起码试一下也好吧，呵呵

xu_shufen

此种情况有时会遇到，可能是纤维蛋白质类物质。是否与分离的单核细胞中，血小板的多少有关。

daifenghao

回复 lyj-0017 的帖子1 e# S; m( L6 w# j1 J) ~, o

1 t0 v+ I: V4 i* Y/ K我们是血浆含量加3%就出现了这个情况

1179240331

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9 ~% r7 T! W4 j: j( |4 n* B
8 D" t5 ^+ G7 \" ]1 r/ d一般到最后，已经洗过了3次，估计血浆物质剩下的不多了。听其他人做的，采血混合不均有凝血的时候，也出现过细胞团块