请教有关活细胞染色和分辨

baby00000003

请教各位老师，可有一种染色方法，可以让活细胞和死细胞之间产生明显的颜色差异么？（苔盼蓝不算）
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" V4 A/ |7 K% q4 B2 ?5 R% X实验目的是“连续观察某一培养体系中细胞群体的生存状况”，
, B6 b$ s( `0 N* B$ K+ a即是说，不是染一次就完事儿，而是随着染色（一次性染色或者将染料添加至培养基都可以），细胞的生存状态可以随时反复观察。# w8 J) l& r2 e; O% F# x
所以trypan blue 或者PI annexin-FITC之类的一次性方法就行不通了6 p3 X, [3 {: l/ [. ^1 U. B1 V

% L. q7 Z1 g7 f6 u比如，使用EGFP基因转染组成型表达，活细胞即表达EGFP，可见绿色（我还不清楚这种蛋白完全降解失色需要多久）
$ n& B1 X. R8 _) k5 C6 U或者有某种可以指示线粒体活性的染料，只要细胞活着，线粒体就有荧光之类的2 r, z7 u. }$ L- d) w' d9 _

7 z& T/ d4 b6 t$ _' E3 P各位老师有做过类似实验的经验可以分享么？" M; `( Y8 c) H
多谢啦！

ytumuyangren

我可以理解为你只观察细胞的状态么？那样你就可以用慢病毒包装GFP基因即可，转染至需要观察的细胞，荧光显微镜下就可以观察了，只要细胞活着GFP就会一直表达。

baby00000003

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那个办法麻烦呢～又浪费钱～% ^" o, j0 k7 S$ K8 Q5 W2 E0 S
我的理想是能在培养基里加某个试剂或者预处理下细胞，简单又便宜的
9 Q' T' Q/ I$ {& D9 J- e只要它活着，就能一直发出可观察的信号，荧光、特殊颜色神马的～

ytumuyangren

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这个好像不好办到，目前了解没看到有这样的对细胞无毒无害还能发出信号的试剂。