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请教CIK培养过程中出现的絮状物问题!!!   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-6-13 22:51 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
我们是采用血液分离机分离外周血单个核细胞,然后加入培养袋中诱导培养CIK,这种方式采集的单个核细胞量较大。; K6 C0 U6 x9 _
我们在培养过程中发现,贴壁后的悬浮细胞转入培养袋中后第二日,或者加入培养袋后两三天后,在培养袋中会出现很多絮状物,我想问的是大家有没有遇到过这种情况呢?大家也帮忙分析一下原因吧,附图片见下。
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沙发
发表于 2013-6-14 13:34 |显示全部帖子
回复 easternliu 的帖子
0 [7 D+ R# z. N/ T. ?
3 y+ B' M' E' V2 U你们是直接采集外周血还是使用血液分离机呢?

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藤椅
发表于 2013-6-14 13:35 |显示全部帖子
回复 sunny.yc 的帖子0 Y+ V, i1 ]- A2 K$ V
# e1 m9 ]  Y0 E' [- ~
不好意思啊,照片拍的时候有点反光,像素也有点低

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板凳
发表于 2013-6-14 13:39 |显示全部帖子
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回复 孙帅帅 的帖子
6 i6 }. v3 w/ i  _: u9 ^" w% l5 Q! h
请问你们是直接采集外周血分离MNC还是机采?3 v7 u+ }- i- ^$ I6 w0 Q7 m
肯定不是细菌感染,染菌我还是能看出来的。
4 m/ t! S; o6 x7 I4 q: v我们是有的细胞是克隆状,但有的就确实会出现絮状物,并且,同一个人的两个培养袋,一个出现絮状物,一个却是长得不错,不知道到底哪里出问题了
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报纸
发表于 2013-6-14 13:42 |显示全部帖子
回复 呼吸 的帖子6 s) D6 D" _! a" @( m
+ D) i% \; n. K0 M# h
使用分离机分离时,采集人员肯定都是按照采集MNC的设定流程操作,这个应该不会错吧。( F5 p6 \' V! p5 y8 H0 {3 i
您指的杂细胞是指什么细胞呢,转袋过滤是要过滤掉什么成分呢?
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地板
发表于 2013-6-14 13:52 |显示全部帖子
回复 chenguangyu 的帖子
8 P: K9 N4 g5 ~7 g' C7 @" D0 Y( K6 G' w- Q* y0 z& S1 v9 o
请问你们是用分离机采集MNC吗?
; w- V; e, W6 K: D/ {$ ]6 V我感觉细胞转袋之后第二天看时,培养袋底部有一层膜状物质,用手轻按就会浮起来变成絮状,在显微镜下观察这些絮状物发现,絮状物都是细胞粘连在一起,这样对细胞后续培养会有什么影响呢?
9 R4 o/ \0 S8 n  H到底为什么这些细胞会粘连在一起呢?还是因为细胞密度太大?抑或是转袋之前没有清洗干净血浆成分?( g) n6 B* f- W7 m
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发表于 2013-6-14 13:53 |显示全部帖子
回复 lizzy_81 的帖子, V% G. ~& r3 T3 r- B, A# f
( F+ n+ C- G/ W9 d7 v
嗯,也许有这个原因,以后制备时注意一下

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发表于 2013-6-14 13:55 |显示全部帖子
回复 sheepthief 的帖子( a; b9 {( t* g8 D7 R  H
& B* z4 Q3 H0 h/ w! j. [! m- @
是有的病人这样,有的不这样,并且,有的病人刚开始时还没有,但是培养几天之后才变成这样,您给帮忙分析一下

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发表于 2013-6-14 13:59 |显示全部帖子
回复 孙帅帅 的帖子" ~% e; D+ \# u  B( H
; E; A5 a: G$ ^! t
是啊,我也很奇怪为什么会这样。
( J# k+ j% V6 G我们是使用分离机采集MNC,而不是直接采血,你们是采集50-100ml外周血进行分离吧?0 e8 i0 l1 t( c
什么是一步法分离外周血MNC?

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发表于 2013-6-14 17:35 |显示全部帖子
回复 daifenghao 的帖子
* v9 n" K. }; |0 v$ O8 A2 ]4 G( a+ P7 B* [
没有添加血浆,我们不用血液离心完后的血浆的
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